我们采用大豆原位遗传转化技术(非组培),重要的突破是该转化技术对大豆基因型普遍适用,除了常规品种外,我们已在黑河43、蒙豆1137、龙垦3092、黑农531、黑科60、合丰35、垦丰16、东农63、龙垦3659等近百个栽培品种中进行高效的转基因和基因编辑遗传转化。
| 优势 | 介绍 |
|---|---|
| 不受基因型限制 | 几乎所有品种都可以成功转化,解决了传统子叶节转化效率低的难题 |
| T0代到T1代稳定遗传 | 通过多轮抗性筛选,转基因可以稳定遗传,嵌合体比例几乎为0(目前最多已稳定遗传到T5代 |
| 转化事件肉眼可见 | 采用独家专利授权RUBY显色基因,在不影响植株生长的前提下可以肉眼筛选阳性植株 |
| 基因编辑载体自清除 | TKC/TKC2独家专利授权,可以在T0代即可完成基因编辑载体接近100%清除 |
| 交付周期大幅提升 | 最快可以2.5个月交付非嵌合体T0代植株 |
以下是大豆遗传转化的主要实验步骤:
本实验针对大豆品种进行遗传转化改良,主要流程包括:首先对大豆生长点进行预处理,为后续的基因导入做准备;接着通过农杆菌侵染的方法将目标基因导入生长点;之后利用特定配比的试剂来诱导不定芽的大量发生;待芽伸长后,利用RUBY显色和抗除草剂筛选标记对转化植株进行多轮筛选和鉴定。整个过程严格控制环境条件和培养参数,以确保转化效率和植株生长质量。最终经过分子检测和大田性状观察,筛选出具有目标性状改良的大豆株系,为品种改良提供材料基础。
| 要求类别 | 具体内容 | 技术标准 | 周期 | 交付物 |
|---|---|---|---|---|
| 种子提供 |
当年新收种子,无病斑、饱满无损伤 优先人工脱粒种子,避免机器脱粒 |
测试种150粒 正式转化种≥1000粒(依品种特性调整) |
- | 品种转化效率测试报告 |
| 客户提供载体/质粒/大肠杆菌 |
1. 自行构建载体需提供: • 完整序列信息 • 抗性基因说明 • 酶切位点图谱 • 引物序列及扩增条件 2. 大肠杆菌需提供: • 新活化甘油菌(-80℃保存) • 含载体的阳性克隆 |
1. 载体纯度:OD260/280≥1.8 2. 浓度:≥50ng/μl 3. 体积:≥20μl 4. 提供测序验证报告(如有) |
1周(材料验证) | 材料接收确认函 质检报告 |
| 客户委托构建载体 |
1. 提供基因信息: • 基因号(如NCBI登录号) • 完整DNA序列(含UTR区域) • 蛋白编码序列(CDS) 2. 载体设计要求: • 过表达/基因编辑类型选择 • 启动子/终止子偏好 • 筛选标记类型(抗生素/除草剂等) |
1. 载体构建周期: • 过表达载体:1周 • 基因编辑载体:2周 2. 质量标准: • 酶切验证+测序确认 • 提供完整载体图谱 |
过表达:1周 基因编辑:2周 |
载体测序报告 甘油菌样本 载体图谱 |
| 转基因检测服务 |
抗生素筛选(卡那霉素/潮霉素/氨苄青霉素等) 除草剂筛选(草甘膦/Bar等) PCR鉴定及测序验证 Southern杂交检测(拷贝数分析) qRT-PCR表达分析 Western blot蛋白表达检测 |
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| 服务流程与节点 |
实验启动
材料接收确认(1个工作日)
载体构建
1-2周(依载体类型而定)
转化测试
3周(品种适应性评估)
阳性筛选
含抗性筛选及分子鉴定
数据交付
汇总报告+统计数据+结题结论
关键节点自动短信通知,实验进度可通过客户管理系统实时查询
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实验材料保存:菌株/载体/受体材料免费保存6个月,电子版报告永久存档
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服务中向客户提供的数据、照片等资料,需满足完整性、规范性、准确性要求,按约定形式和时效交付,涉及保密信息的需遵守保密协议。
| 要求类别 | 具体内容 | 技术标准 | 周期 | 交付物 |
|---|---|---|---|---|
| 种子提供 |
当年新收种子,无病斑、饱满无损伤 优先人工脱粒种子,避免机器脱粒 |
测试种150粒 正式转化种≥1000粒(依品种特性调整) |
- | 品种转化效率测试报告 |
| 载体与菌株 |
自行构建载体需提供: 序列、抗性、酶切位点、引物等信息 |
大肠杆菌需提供: 新活化甘油菌(-80℃保存) |
1-2周(载体构建) | 载体测序报告 甘油菌样本 |
| 基因数据 |
提供基因号及DNA序列 无基因组数据库的基因需提供: 完整DNA序列和RNA序列 |
载体选择要求: 过表达/基因编辑类型 筛选标记类型(抗生素/除草剂等) |
- | 基因序列文档 载体方案书 |
| 检测项目 |
转基因抗性鉴定(抗生素/除草剂/其他) 转基因PCR鉴定及测序 转基因试纸条检测 表达水平荧光定量PCR鉴定 |
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| 服务流程 |
1. 载体构建及确认:过表达1周/基因编辑2周(含测序及效率验证) 2. 转化能力测试:3周(品种转化效率和再生能力评估) 3. 阳性苗筛选:含抗性筛选及分子鉴定 4. 结题报告:汇总报告+统计数据+结题结论 |
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实验材料保存:菌株/载体/受体材料免费保存6个月,电子版报告双方存档
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该品种由黑龙江省农业科学院大豆研究所育成,蛋白质含量高,抗逆性强,适合在北方地区推广种植。
东北农业大学选育的高产稳产大豆品种,具有适应性广、抗倒伏能力强等特点,适合机械化收割。
北大荒垦丰种业股份有限公司选育,脂肪含量高,适合榨油加工,在黑龙江省及内蒙古东部地区表现良好。
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